Determinação de valores basais do teste do micronúcleo e ensaio do cometa em Tropidurus hispidus e Ameiva ocellifera (Squamata, Tropiduridae e Squamata, Teiidae)

Determinação de valores basais do teste do micronúcleo e ensaio do cometa em Tropidurus hispidus e Ameiva ocellifera (Squamata, Tropiduridae e Squamata, Teiidae)

• Autor
• Thiago Vinicius Santos e Alves
• Co-autores
• Carlos Eduardo Alves Soares , Daniel Cunha Passos , Francisco Chagas Barbalho Neto
• Resumo

•  

  Tropidurus hispidus é uma espécie de lagarto de pequeno porte que é bastante difundido em toda a região que se estende da Venezuela até a Argentina, incluindo o Brasil. Com o crescimento das fronteiras agrícolas muitas das áreas utilizadas para esse fim  sobrepuseram ás áreas onde habitam essa espécie. Na agricultura moderna é muito comum o uso de agrotóxicos com a finalidade de controlar pragas e doenças nas plantações. Aquelas substâncias químicas dispersas no ambiente podem provocar alterações genéticas em indivíduos dessa espécie o que leva fatalmente a mutações e aos processos de carcinogênese. Pensando nisso o presente trabalho objetivou adaptar duas técnicas genotóxicas amplamente utilizadas, o teste do micronúcleo e o ensaio do cometa, para determinar os valores basais desses testes nessa espécie. O micronúcleo (MN) consiste na formação de um núcleo secundário que se dá devido ao desprendimento de parte do DNA do núcleo principal. O ensaio do cometa (EC) quantifica os níveis de degradação do DNA de células a partir da formação de uma “cauda de cometa”, a qual se origina pela migração das partes do DNA degradado do núcleo num processo de eletroforese. Essa degradação é estimada por meio da observação de classes, as quais variam de 0 a 4, sendo nenhum dano ao DNA ou DNA altamente danificado, respectivamente. Essa pesquisa teve autorização prévia do Comitê de Ética de Uso de Animais da UFERSA (processo No 23094.003348/2018-10, parecer N° 23091.003348/2018- 10) e pelo Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (licença No 57169-1). Para o estudo foram utilizados 29 exemplares da espécie (18 machos e 11 fêmeas), todos foram coletados no campus da UFERSA e na Fazenda Experimental Rafael Fernandes, em áreas teoricamente livre de contaminantes. Desses animais, 21 foram utilizados somente para o teste do micronúcleo, 4 somente para o ensaio do cometa e outros 4 para ambos os testes. Os animais foram eutanasiados e cerca de 0,5 mL de sangue de cada indivíduo foi coletado por meio de punção cardíaca. Para o teste do micronúcleo, lâminas de microscopia foram preparadas por esfregaço essas lâminas foram coradas com Giemsa 0,6% durante 15 minutos e observadas no microscópio óptico de captura de imagem, marca Olympus, modelo BX-41, aumento de 1.000x. As células foram analisadas utilizando os programas NIS-elements F e ImageJ. Foram obtidos os seguintes resultados: o valor médio de 0,92 ±1,04 para cada 1.000 células observadas. Para o ensaio do Cometa as amostras foram separadas em dois grupos, um dos grupos recebeu um tratamento com peróxido de hidrogênio (controle positivo) e o outro não recebeu tratamento padrão (controle). Foram obtidos os seguintes resultados: o grupo controle apresentou um valor médio de 51,25 ±4,72, já o grupo controle positivo apresentou o valor médio de 128,25 ±15,39. Com isso, concluímos que as duas técnicas podem ser aplicadas na espécie de lagarto em estudo e que seus parâmetros basais foram similares aos parâmetros observados em outras espécies de répteis.

   

• Palavras-chave
• Genotoxicidade, Micronúcleo, Cometa, Lagarto.
• Área Temática
• Outros ou Multidisciplinar

Voltar Download