EFEITOS AUTÓCRINOS DO T3 NO COMPLEXO ATP SINTASE E SEUS POTENCIAS DESDOBRAMENTOS

EFEITOS AUTÓCRINOS DO T3 NO COMPLEXO ATP SINTASE E SEUS POTENCIAS DESDOBRAMENTOS

• Autor
• Ana Caroline Rippi Moreno
• Co-autores
• Yago Carvalho Lima , Ana Carolina Panveloski Costa , Caroline Serrano do Nascimento , Maria Tereza Nunes
• Resumo

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  Introdução: O sistema endócrino atua integrando o funcionamento de diferentes tecidos através da síntese e secreção de hormônios fundamentais. Os hormônios tireoidianos (HT: T3 e T4) se destacam uma vez que todas células apresentam receptores (THRs) para os mesmos. A ação dos HT sobre as mitocôndrias foi uma das primeiras a serem identificadas e associada aos seus efeitos sobre a taxa metabólica. No entanto, a tireoide apresenta THRs e pouco se sabe sobre as ações autócrinas do T3. Através da análise do transcriptoma de células tireoidianas PCCL3 mantidas na ausência e presença de T3, por meio de sequenciamento de nova geração (RNAseq), identificamos 3 genes que codificam proteínas dos complexos da ATP Sintase e que são diferencialmente expressos pelo T3:    Atp5h (D subunit of mitochondrial ATP synthase), Atp5i (E subunit of mitochondrial ATP synthase) e Usmg5 (Up-regulated during skeletal muscle growth protein). Objetivo: Avaliar possíveis efeitos autócrinos do T3 sobre a expressão destes genes e proteínas codificadas por eles, no modelo in vivo. Métodos: O estudo (CEUA :92/2017) empregou 28 ratos Wistar, com ±45 dias de idade, divididos aleatoriamente em três grupos: Controle (n=9), que recebeu água ad libitum e injeções ip de salina (~300 µl); Hipo (hipotireoideo) (n=10), que recebeu água ad libitum com Metimazol (0,03%) e injeções ip de salina (~300 µl); e T3 (n=9), que recebeu água ad libitum e injeções ip de T3 (~300 µl; 1,5 µg/100g de PC). Após duas semanas de intervenção, os animais foram anestesiados com Ketamina e Xilazina, decapitados e a tireoide foi removida, sendo um de seus lobos utilizado para a extração do RNA e avaliação da expressão gênica por RT-qPCR, e o outro para a extração e análise da expressão de proteínas por Western Blotting. Resultados: Dos três genes analisados, a Atp5h, apesar de seguir o padrão apresentado pelo RNAseq, não atingiu o nível de significância escolhido (P<0,05). Os genes Usmg5 (Hipo x T3 p0,02) e Atp5i (Hipo x T3 p=0,0002; Hipo x Controle p=0,004) apresentaram expressão reduzida no grupo Hipo, sugerindo a importância dos HT para a expressão desses genes fundamentais da ATP Sintase.  No entanto, ao analisarmos o conteúdo proteico, observamos aumento significante das três proteínas nos animais Hipo: ATP5H (Hipo x Controle p=0,005 e Hipo x T3 p=0,002), ATP5I (Hipo x T3 p=0,03) e USMG5 (Hipo x Controle p=0,009 e Hipo x T3 p=0,003). Discussão: Sabe-se que a redução da expressão de alguns genes essenciais para a manutenção de processos vitais, desencadeia mecanismos compensatórios, como aumento da poliadenilação de seus mRNAs, o que aumenta a sua meia vida e taxa de tradução. Considerando que esse aparente paradoxo entre expressão gênica e proteica foi observado neste estudo, e que essas proteínas são fundamentais para a função celular, acreditamos que tais mecanismos compensatórios possam também ter sido ativados, razão pela qual, pretendemos investigar o comprimento da cauda poli(A) desses mRNAs, e sua taxa de tradução. Conclusão: Esse estudo revela ações autócrinas do T3 sobre a função mitocondrial, especificamente sobre genes e proteínas do complexo ATP Sintase, possibilitando desdobramentos terapêuticos, uma vez que a disfunção mitocondrial está relacionada à diversas doenças metabólicas, nas quais a função tireoidiana também pode estar comprometida.

  Agência de fomento: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES); Projeto: 88887.363296/2019-00.

   

• Palavras-chave
• Hormônio Tireoidiano; Mitocôndria; ATPsintase; Efeito Autócrino.
• Área Temática
• Fisiologia Endócrina