A EXPRESSÃO DE TET3 ESTÁ AUMENTADA NA DOENÇA GLOMERULAR

A EXPRESSÃO DE TET3 ESTÁ AUMENTADA NA DOENÇA GLOMERULAR

• Autor
• Beatriz Maria Veloso Pereira
• Co-autores
• Karina Thieme
• Resumo

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  INTRODUÇÃO:  Mudanças no padrão de metilação dos genes podem ser iniciadas por alteração na expressão/atividade das proteínas TET (do inglês, ten-eleven translocation), cuja ação leva à hidroximetilação do DNA. Sua função se contrapõe a ação das enzimas DNA metiltransferases (DNMTs) que induzem a metilação do DNA e o silenciamento gênico. O balanço dessas enzimas  pode então determinar a expressão gênica. Vários estudos têm mostrado o papel das alterações epigenéticas no desenvolvimento da doença renal crônica (DRC). No entanto, o papel das TETs na DRC tem sido pouco explorado.  

  OBJETIVO: O objetivo desse trabalho foi avaliar a expressão da proteína TET3 em modelo de doença renal crônica in vivo e in vitro. Em especial, foi utilizado modelo de glomeruloesclerose segmentar e focal cuja origem é atribuída à perda de podócitos, células epiteliais especializadas e não proliferativas, que formam a barreira de filtração glomerular.  

  MÉTODOS: Todos os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais (CEUA n^o 5348280918). Animais machos Balb/C-JAX (18-25g) foram tratados com dose única de Adriamicina (10.5 mg/kg) ou veículo (PBS), por meio de injeção na veia caudal. 7 dias após a injeção, os animais foram alocados em gaiolas metabólicas para coleta de urina de 24 horas e em seguida foram eutanasiados para coleta de ambos os rins. Um dos rins foi utilizado para análise histológica com ácido periódico de schiff (PAS) e imunohistoquímica (IHC) contra TET3. Adicionalmente, cultura celular de podócitos humanos imortalizados foram tratados com Adriamicina (3µg/mL) por 72h e em seguida coletados para análise da expressão proteica (Western Blot) e transcritos (RT-qPCR) de TET3.

  RESULTADOS: Como esperado, os animais tratados com Adriamicina apresentaram proteinúria maciça, acúmulo de casts de proteína nos túbulos e glomeruloesclerose focal. Os resultados de IHC, revelaram que os animais do grupo Adriamicina apresentam expressão de TET3 aumentada quando comparado com os animais do grupo controle. De maneira similar, os podócitos tratados com Adriamicina apresentaram aumento da expressão proteica de TET3 (P=0,0346), embora a expressão de transcritos esteja diminuída (P<0,0001).   

  CONCLUSÃO: Os resultados mostram que no contexto da doença glomerular e injúria de podócitos, a expressão de TET3 está aumentada nestas células. Os próximos passos incluem o estudo de (hidroxi)metilação de genes que possam estar contribuindo para a patogênese da doença glomerular.

  AGÊNCIA DE FOMENTO: FAPESP, Projeto: 2019/10583-0, 2018/00573-4; CAPES 001; CNPQ, Projeto: 428482/2018-0.

   

• Palavras-chave
• podócitos, TETs, epigenética, doença renal crônica
• Área Temática
• Fisiologia Renal