CARACTERIZAÇÃO DA EXPRESSÃO DE ENZIMAS EPIGENÉTICAS E DE INJÚRIA RENAL EM CAMUNDONGOS COM OBESIDADE E DIABETES DO TIPO 2

CARACTERIZAÇÃO DA EXPRESSÃO DE ENZIMAS EPIGENÉTICAS E DE INJÚRIA RENAL EM CAMUNDONGOS COM OBESIDADE E DIABETES DO TIPO 2

• Autor
• Maria Luiza Ribeiro SIlva
• Co-autores
• Beatriz Maria Veloso Pereira , Karina Thieme
• Resumo

• INTRODUÇÂO: A doença renal diabética (DRD) é uma das comorbidades associadas ao diabetes tipo 2 e tem sido apontada como a principal causa de doença renal em estágio terminal. No entanto, a compreensão dos mecanismos que produzem as alterações morfo-funcionais que ocorrem nos rins ainda permanece incompleta. Estudos têm demonstrado que as modificações epigenéticas podem levar a alterações na expressão de genes e por consequência a ativação de vias de sinalização deletérias e a redução na expressão de moléculas nefroprotetoras. Em particular, é relevante investigar o equilíbrio dinâmico da expressão/atividade das enzimas envolvidas no processo de metilação do DNA, as DNA metil-transferases (DNMT), e na desmetilação ativa promovida pelas proteínas ten-eleven-translocation (TETs). OBJETIVO: Este estudo busca caracterizar a expressão das enzimas epigenéticas bem como de proteínas implicadas no desenvolvimento e/ou a progressão da DRD em modelo experimental de camundongos BTBR ob/ob, que apresentam diabetes do tipo 2 e obesidade.  MÉTODOS: Todos os protocolos experimentais foram aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA 5348280918). Camundongos BTBR ob/ob machos (n=6 por grupo), foram acompanhados durante 14 semanas. Os parâmetros metabólicos foram avaliados em 8, 10 e 14 semanas. Nestes mesmos períodos, os animais foram alocados em gaiolas metabólicas por um período de 6 horas para coleta de urina e posterior avaliação da concentração de creatinina e excreção urinária de albumina. Ao final do período o tecido renal foi coletado para avaliação exploratória da expressão gênica, por meio de RT-qPCR e da expressão proteica por immunoblotting e imunomarcação das enzimas epigenéticas DNMT e TET, bem como de vias de sinalização importantes para a injúria renal. RESULTADOS: Nos resultados iniciais foram observados aumento no peso corporal (p <0,0001), na glicemia de jejum jejum (p = 0.0114), no fluxo urinário (p = 0.0002) e na albuminúria (p = 0.01313), bem como a diminuição na excreção de creatinina (p = 0.0040) nos camundongos ob/ob em relação aos controles (wild type). Estes dois últimos fatores indicam uma possível injúria renal. A respeito das gorduras inguinal e marrom, ambas aparecem elevadas nos animais ob/ob quando comparados aos animais wild type (p<0.0001) (p = 0,0008). Os resultados demonstraram uma redução na expressão de transcritos de Dnmt1 (p= 0.04) e proteica de TET3 nos animais ob/ob em comparação com os animais wild type. Adicionalmente, foi observado uma diminuição na expressão Kl (codificador da proteína Klotho) (p= 0.008) e um aumento de Acta2 (codificador de actina de músculo liso, ?-SMA) (p= 0.002) nos animais do grupo ob/ob. Os demais genes investigados não sofreram alterações, entre eles: Nphs1 (nefrina), Nphs2 (podocina), Col4a1 (colágeno IV), Tet1 e Dnmt3. Observou-se também uma correlação positiva entre a expressão do transcrito de Tgfb1 (codificador do fator de transformação de crescimento, TGF-?) e a glicemia (p= 0.0416, R=0,.530) e uma correlação negativa entre a expressão do transcrito de Kl (Klotho) e a glicemia (p= 0.0477, R=0.3374).  CONCLUSÃO: Os resultados iniciais demonstram que os animais BTBR ob/ob desenvolvem progressivas alterações metabólicas e da função renal. Além disso, observamos alterações na expressão de marcadores de injúria renal e de enzimas epigenéticas importantes. AGÊNCIA DE FOMENTO: CAPES, Código: 001; CNPq, Projeto: 428482/2018-0 Fapesp, Projeto: 2018/00573-4 e 2020/12114-4.

   

• Palavras-chave
• doença renal diabética, enzimas epigenéticas, diabetes tipo 2
• Área Temática
• Fisiologia Renal