Ouabaína, angiotensina II e ciclooxigenase-2: interações celulares no controle da fisiologia vascular

Ouabaína, angiotensina II e ciclooxigenase-2: interações celulares no controle da fisiologia vascular

• Autor
• Henrique Charlanti Reis Assunção
• Co-autores
• Luciana Venturini Rossoni
• Resumo

• A ouabaína é um glicosídeo cardenolídeo, encontrado em humanos. Interage com a Na+-K+-ATPase (NKA), inibindo sua atividade, e regulando proteínas quinases através de sua atividade signalossome (cSRC, por exemplo), promovendo diversos efeitos como hipertrofia, produção de óxido nítrico (NO) e espécies reativas de oxigênio (ERO). Níveis altos desse glicosídeo estão associados com patologias cardiovasculares. Modelos experimentais com administração crônica de ouabaína corroboram para uma ação hipertensiva, demonstrando aumento sustentado na pressão arterial, alterações na reatividade vascular e induzindo remodelamento vascular (efeitos leito-específicos). Parte dessas ações vasculares estão relacionadas com angiotensina II (AII) e ciclooxigenase (COX)-2. Essas interações foram demonstradas em diferentes células, tecidos e sistemas. Ademais, a sinalização intracelular da ouabaína e da AII possuem convergências, como cSRC e ERO, e existem evidências da necessidade do receptor de AII do tipo 1 (AT1R) nos efeitos da ouabaína em células renais. Estudos de ouabaína em células endoteliais são escassos, e o conhecimento de suas interações com AII e COX-2 pode propiciar esclarecimento de sua ação vascular. Portanto, o presente projeto visa avaliar a sinalização da ouabaína em célula endotelial, e possíveis interações com AII e COX-2. Para isso, será realizado curva concentração/tempo-resposta de ouabaína em células endoteliais humanas (EA.hy926), avaliando a fosforilação de cSrc. Com as melhores concentrações e tempos, será avaliado em detalhe a participação da AII e da COX-2, através da inibição de enzima conversora de AII e COX-2, e do antagonismo AT1R; em paralelo, será utilizado RNA interferente pequeno, para promover o silenciamento de AT1R e COX-2. A rostafuroxina, antagonista da via signalossome da ouabaína, também será avaliada. Os aspectos avaliados serão: expressão gênica e proteica das vias envolvidas, através das técnicas de qRT-PCR e Western-Blot; síntese e liberação de NO, ERO, usando sondas fluorescentes; síntese e liberação de prostanoides e AII, utilizando ELISA; e, proliferação celular. 

• Palavras-chave
• ouabaína; angiotensina II; ciclooxigenase-2; endotélio; sinalização intracelular
• Área Temática
• Vídeo-pôster / Sala 3 - Fisiologia Vascular

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