POLIPEPTÍDEO RECOMBINANTE DE Mycobacterium leprae COMO FERRAMENTA POTENCIAL PARA O DIAGNÓSTICO DE HANSENÍASE

POLIPEPTÍDEO RECOMBINANTE DE Mycobacterium leprae COMO FERRAMENTA POTENCIAL PARA O DIAGNÓSTICO DE HANSENÍASE

• Autor
• ANDRESSA FELIZARI ESCOBAR PEIXOTO
• Co-autores
• MARCELO DOS SANTOS BARBOSA , CAROLINA RANGEL DE LIMA SANTOS , MURILO DE ASSIS POSTAUE , IARA BEATRIZ ANDRADE DE SOUSA , NILSON HENRIQUE DA SILVA , SILVANA BEUTINGER MARCHIORO
• Resumo

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  A hanseníase é endêmica em várias partes do mundo, afetando milhões de pessoas. A doença é transmitida no contato direto com pessoas infectadas pela inalação do bacilo Micobacterium leprae, causa lesões na pele e alterações neurológias, além de outros sintomas sistêmicos. O diagnóstico da hanseníase é baseado na baciloscopia e histopatologia e a confirmação é feita através dos sinais e sintomas apresentados pelos pacientes. Não existe um método com sensibilade e especificidade requeridos para detecção de todos os casos o que é essencial para um melhor controle e diminuição dos índices epidemiológicos da doença. O objetivo deste estudo foi projetar uma sequência de DNA contendo 15 epitopos de 6 proteínas de M. leprae, e o critério para a escolha dos epitopos foi a sensibilidade e afinidade com moléculas de MHC-I e MHC-II. A sequência de DNA foi projetado usando o programa Vector-NTI® e sintetizado pela empresa Epoch Biolabs (Texas, EUA). Testes de bioinformática foram utilizados para avaliar, in silico, a viabilidade para utilizar o polipeptídeo como ferramenta de diagnóstico. O gene foi clonado em um plasmídeo pAE, utilizando as enzimas de restrição HindIII e BamHI, e expresso em Escherischia coli. Um teste de expressão em pequena escala foi feito utilizando 8 cepas diferentes de E. coli BL21(DE3). Para purificação, utilizou-se cromatografia de afinidade em colunas de Ni-NTI, seguida de caracterização por eletroforese em gel de poliacrilamida SDS-PAGE 12% e Western Blot. Os resultados das análises indicaram que, in silico, o polipeptídeo tem potencial para reconhecimento sorológico em pacientes com hanseníase. Foi possível expressar e purificar quantidades significantes deste polipeptídeo, que podem ser usadas em testes sorológicos.

• Palavras-chave
• M. leprae; polipeptídeo recombinante; diagnóstico.
• Área Temática
• INFECTOLOGIA

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