Estresse crônico imprevisível prejudica a reatividade vascular em camundongos machos e fêmeas de maneira dependente do sexo

Estresse crônico imprevisível prejudica a reatividade vascular em camundongos machos e fêmeas de maneira dependente do sexo

• Autor
• Rinaldo Rodrigues dos Passos Junior
• Co-autores
• Fernanda Priviero , Raiana de Moraes , Olufunke Arishe , Stephanie Wilczynski , Ashley Snyder , Alexia Crockett , Noelle Frambes , Kyle Stegmann , Amelia Churillo , Susan Wood , Francis Spinale , Michael Ryan , Fiona Hollis , Clinton Webb
• Resumo

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  Introdução: A interação entre os sistemas nervoso e imunológico demonstrou estar relacionada aos efeitos negativos do estresse na vasculatura, por mecanismos ainda desconhecidos. Sabe-se que estresse crônico leva ao aumento da produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), causando dano vascular. O aumento de EROs ocasiona a liberação de DNA mitocondrial (mtDNA) no citosol, e mtDNA promove a ativação de inflamassomas que tem papel no estabelecimento da disfunção endotelial. Assim, a hipótese do presente estudo é de que durante o estresse crônico, o estresse oxidativo causa liberação de mtDNA no citosol, através do aumento na expressão vascular de gasdermina D (GSDMD) e VDAC, ativando inflamassomas e levando à disfunção endotelial e, consequentemente, à hipertensão. Métodos: Protocolo aprovado pelo comitê institucional de cuidados e uso de animais da Universidade da Carolina do Sul (IACUC #2571-101654-102521). Camundongos C57BL/6 machos e fêmeas (8-10 semanas; 20-25g) foram submetidos ao protocolo de estresse crônico imprevisível por 28 dias através da exposição a diferentes estressores. O grupo controle (CTL) foi composto por camundongos machos e fêmeas que não foram expostos ao ECI. Ao final do protocolo a pressão arterial sistólica (PAS) foi aferida através de pletismografia de cauda. Após eutanásia, artérias mesentéricas de resistência (AMRs) e aorta foram coletadas para estudos da função vascular em miógrafo. Curvas concentração-resposta para fenilefrina (PE; 1nM-30µM) e acetilcolina (ACh; 1nM-30µM) foram realizadas. A expressão de GSDMD foi quantificada em AMRs por western blot. O tecido cardíaco foi removido para avaliação da expressão gênica do inflamassoma NLRP3, e das interleucinas IL-1b e IL-18 pela técnica de PCR.  As curvas concentração-resposta foram analisadas utilizando análise de regressão não linear. A análise de variância ANOVA one-way ou teste t de Student foram utilizados para determinar a significância estatística (p<0,05). Os dados foram analisados através do GraphPad Prism e apresentados como média ± erro padrão da média (EPM). Resultados: Em camundongos submetidos ao ECI, a PAS (mmHg) encontrou-se elevada em machos (ECI 123±4 vs. CTL 103±3) e fêmeas (ECI 138±5 vs. CTL 111±6), quando comparado ao grupo CTL. Observou-se um aumento da resposta contráctil à PE em AMRs de machos ECI, com um aumento da resposta máxima (mN; EMAX ECI 9±1 vs. CTL 6±2), o que não foi observado em fêmeas. Houve uma redução do relaxamento em AMRs de machos e fêmeas submetidos ao ECI, com redução da potência à ACh em machos (pEC50 ECI 7±0,5 vs. CTL 6±0,6) e em fêmeas (pEC50 ECI 7±0,3 vs. CTL 6±0,5). A aorta de machos ECI apresentou uma redução da resposta contráctil à PE e da resposta máxima (mN; EMAX ECI 3±0,2 vs. CTL 5±0,5), o que não foi observado em fêmeas. A expressão tecidual de GSDMD encontrou-se elevada em AMRs de machos e fêmeas submetidos ao ECI. Ademais, o tecido cardíaco de camundongos expostos ao ECI apresentou aumento da expressão gênica do inflamassoma NLRP3 e das interleucinas IL-1b e IL-18. Conclusão: Em ambos os sexos, o ECI induziu disfunção vascular observada por reatividade prejudicada à ACh e PE, de maneira dependente do sexo, culminando no aumento da pressão arterial. A expressão aumentada de GSDMD sugere a liberação de mtDNA como possível mecanismo. No tecido cardíaco, o aumento da expressão gênica de NLRP3 evidencia o papel desse inflamassoma no estabelecimento da hipertensão frente ao estresse crônico.

   

• Palavras-chave
• hipertensão, disfunção vascular, estresse crônico, inflamassoma
• Modalidade
• Comunicação oral
• Área Temática
• Trabalhos originais