Efeito Da Exposição À Micropartículas Isoladas De Pacientes Pós-Covid-19 Em Células Endoteliais Saudáveis E Sob Restrição De Aminoácidos

Efeito Da Exposição À Micropartículas Isoladas De Pacientes Pós-Covid-19 Em Células Endoteliais Saudáveis E Sob Restrição De Aminoácidos

• Autor
• Juliana Quinholi Rocha
• Co-autores
• Letícia Barssotti dos Santos , Ana Paula Couto Davel
• Resumo

• Efeito Da Exposição À Micropartículas Isoladas De Pacientes Pós-Covid-19 Em Células Endoteliais Saudáveis E Sob Restrição De Aminoácidos

  Quinholi, J 1; Barssotti, L2; Davel, AP2.

  1 Faculdade de Ciências Farmacêuticas - FCF/Unicamp; 

  2 Instituto de Biologia- IB/Unicamp.

  Estudos demonstram que de 40 a 80% de pacientes recuperados da infecção por SARS-CoV-2 desenvolvem complicações cardiovasculares que podem persistir por até 12 meses após o diagnóstico. Dentre vários fatores que se associam à gravidade da COVID-19, encontra-se a desnutrição. Nesse cenário, a disfunção endotelial é um dos possíveis mecanismos que contribuem para as sequelas cardiovasculares pós-COVID-19. As micropartículas (MP) circulantes, estruturas membranosas liberadas a partir de ativação ou apoptose celular, carregam moléculas bioativas e podem desencadear respostas vasculares como disfunção endotelial e estresse oxidativo. Assim, levantamos a hipótese de que MP poderiam contribuir para disfunção endotelial na COVID-19 longa. O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos de MP isoladas de pacientes pós-COVID-19 grave na sobrevivência e função secretória de células endoteliais saudáveis e sob restrição de aminoácidos (aa). Para tal, MP circulantes foram isoladas do plasma de pacientes que desenvolveram COVID-19 grave e foram internados no Hospital de Clínicas da UNICAMP (CAAE: 32076720.9.0000.5404), 1 e 6 meses após a alta hospitalar. Células endoteliais (BAEC) confluentes foram cultivadas em DMEM controle (100% aa) ou DMEM restrição de aa (25% aa) por 48h. Nas últimas 24h, as células endoteliais foram expostas às MP (105 e 106 MP/ml) ou veículo (PBS estéril). Ao fim do protocolo avaliou-se a morte celular (Ho-Pi) e a produção de óxido nítrico (NO) e peróxido de hidrogênio (H2O2) pela fluorescência ao DAF-2DA e Amplex Red, respectivamente. Os dados estão expressos como média±EPM, P<0,05. Como resultados observamos que a restrição de aa elevou a taxa de morte celular (+70,83%), assim como reduziu a liberação de NO (-34,13%) e H2O2 (-24,36%) nas células endoteliais. A incubação das células endoteliais com as MP isoladas de pacientes 1 e 6 meses pós-COVID-19, independente da dosagem, não alterou esses parâmetros quando em meio controle. No entanto, em meio com restrição de aa, a exposição às MP de 1 e 6 meses, nas duas doses estudadas, resultou em aumento de H2O2, sem alterar a produção de NO ou a taxa de morte celular. Em conjunto, os dados sugerem que a restrição de aa in vitro causa disfunção da célula endotelial, com aumento da morte celular e redução da liberação de NO e H2O2. As MP isoladas na fase pós-COVID grave não afetaram os parâmetros avaliados em células endoteliais controle. Porém, na situação de restrição de aa, as MP 1 e 6 meses pós-COVID elevaram a produção de H2O2. Assim, a restrição de aa pode ser um fator de risco para a atividade das MP elevarem a produção de espécies reativas do oxigênio (ROS).

   

  Financiamento: PIBIC/CNPq; FAPESP 2020/09799-5 e 2022/14898-8.

   

  Palavras-Chave: COVID-19 longa; restrição proteica; célula endotelial.

   

• Palavras-chave
• COVID-19 longa; restrição proteica; célula endotelial.
• Modalidade
• Pôster
• Área Temática
• Trabalhos originais