A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) é a doença hepática mais comum no mundo. Cerca de 25% dos pacientes com DHGNA desenvolvem esteato-hepatite não alcoólica (EHNA), a forma inflamatória da doença que pode evoluir para cirrose e insuficiência hepática. Neste estudo buscamos avaliar o papel do colesterol como insulto modulador da progressão da DHGNA, em especial de danos microcirculatorios. Inicialmente, o modelo experimental de DHGNA/EHNA foi induzido em 20 camundongos machos C57BL/6 utilizando uma dieta rica em gordura e carboidrato (HFHC) por 31 semanas. Adicionalmente, entre as semanas 31 e 39, 10 camundongos foram alimentados com uma dieta acrescida de 2% de colesterol (HFHC+COL) (CEUA L-012/2018 A1). Quanto as análisea microcirculatórias, o recrutamento de leucócitos e o número de células estreladas hepáticas positivas para vitamina A foram avaliados na microcirculação por microscopia intravital. A fluxometria foi usada para avaliar in vivo a perfusão microcirculatória. Os resultados foram expressos em média ± desvio padrão da média. As comparações entre os grupos foram feitas utilizando ANOVA one-way seguido pelo teste post hoc de Tukey. Valores de p<0,05 foram considerados significativos. Com 39 semanas, o grupo HFHC+Col apresentou hepatomegalia (CTL: 0,06±0,003 vs HFHC+Col: 0,15±0,009; gramas; p<0,001) e fígado com descoloração amarelo pálido, indicando esteatose hepática. Histologicamente, o grupo HFHC+Col mostrou esteatose, tanto macro quanto microvesicular, inflamação hepática, dano hepatocelular e fibrose, quando comparados aos demais grupos. O grupo que recebeu colesterol, apresentou maior marcação para a alfa-actina de músculo liso, aumento da transcrição de COL1A1 no figado (HFHC+Col: 40,8±6,4 vs CTL: 1,0±0,1 e HFHC 14,2±2,9; expressão relativa/?-actina; ambos p<0,001) e maior ativação de células estreladas (HFHC+Col: 28,5±3,9 vs CTL: 124,3±3,0 e HFHC 56,5±5,7; nº células vitamina A+; ambos p<0,001) comparativamente aos demais grupos. Por citometria de fluxo demonstrou-se evidência de polarização TH1 pela razão IFN-?/IL-4, no grupo HFHC+Col (p=0,022). Os grupos HFHC e HFHC+Col apresentaram uma redução de 56% e 71% respectivamente, (ambos p<0,001) no fluxo sanguíneo microvascular hepático, sendo o comprometimento observado no grupo HFHC+Col mais pronunciado (p=0,045). A suplementação com colesterol também levou a um recrutamento de leucócitos superior na microcirculação do fígado, com maior rolamento (HFHC+Col: 13,3±1,4 vs CTL: 2,2±0,3 e HFHC 8,9±0,4; nº de leucócitos rolando/30s; p<0,001 e p=0,002 respectivamente) e adesão leucocitária (HFHC+Col: 13,0±1,3 vs CTL: 2,0±0,4 e HFHC 9,6±1,0; nº de leucócitos aderidos/30s; p<0,001 e p=0,023, respectivamente), além de aumentar o nível de transcritos de mRNA para HIF1A (HFHC+Col: 1,8±0,14 vs CTL: 1,0±0,12 e HFHC 1,4±0,05; expressão relativa/?-actina; p<0,001 e p=0,044 respectivamente), e ICAM-1 (HFHC+Col: 4,2±0,1 vs CTL: 1,3±0,4 e HFHC 2,2±0,4; expressão relativa/?-actina; p<0,001 e p=0,012 respectivamente) em comparação aos demais grupos. Com base nesses resultados, concluímos que a lipotoxicidade induzida pelo colesterol exacerbou a hepatomegalia, os danos metabólicos, hepáticos, inflamatórios e distúrbios microcirculatórios induzidos pela dieta HFHC. Paralelo a isso, mostramos que a hipóxia crônica pode atuar como um fator exacerbado pela (ou exacerbador da) lipotoxicidade e, mais importante, podendo ser uma ligação entre esteatose simples e EHNA.
Comissão Organizadora
Gustavo Carvalho
Luiza Malacco
Eliana Hiromi Akamine
Profª Drª Luciana Venturini Rossoni
Ana Paula Couto Davel
José Wilson do Nascimento Corrêa
GIULIA ALESSANDRA WIGGERS
Alice Valença Araújo
Comissão Científica
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