Ouabaína Reduz a Viabilidade Celular, na Dependência da Concentração, em Cultura de Células Endoteliais.

Ouabaína Reduz a Viabilidade Celular, na Dependência da Concentração, em Cultura de Células Endoteliais.

• Autor
• Henrique Charlanti Reis Assunção
• Co-autores
• Luciana Venturini Rossoni
• Resumo

• É bem conhecido que a ouabaína (Oua) interage com a Na+-K+-ATPase e regula vias intracelulares por meio de sua atividade signalosome, como a fosforilação da cSRC. Em células endoteliais, a Oua possui ações relacionadas a proliferação, morte e sobrevivência celular. Altas concentrações (acima de 1 µM) induzem morte celular via aumento da razão Bax/Bcl-2 e via Rho kinase. Já concentrações menores, no entanto, promovem inibição da ativação de caspase-3 induzida pela ausência de soro, com consequente aumento da sobrevivência e proliferação celular. No entanto, ainda não há um consenso com relação a essa ação dual da Oua. Essas incertezas podem variar devido ao modelo celular estudado, a condição antes e durante o experimento, o ensaio utilizado, entre outros. Fundamentado nos resultados acima, objetivou-se avaliar a viabilidade das células endoteliais frente a estimulação com Oua. Células endoteliais de veia umbilical humana imortalizada (HUVEC-im) e o modelo EA.hy926 (hibridoma de HUVEC com uma célula tumoral) foram estimuladas com concentrações crescentes de Oua (0,01 nM a 1 µM), em meio com  ou sem soro fetal bovino (SFB), por 6, 24 e 48h. Ao final, a viabilidade/proliferação celular foi avaliada com o ensaio de redução de brometo de tiazolil azul de tetrazolio (MTT). Os dados foram normalizados pelo basal e expressos em porcentagem de viabilidade celular ± EPM e analisados por meio de ANOVA 3 vias (n=3-4). CEP-ICB:1222/22. Nas duas linhagens, 6h de incubação com OUA, em meio com e sem SFB, não alterou a viabilidade celular. Em incubações por 24 h com Oua, com SFB, não alterou significativamente a viabilidade de HUVEC-im em nenhuma concentração avaliada. Já em EA.hy926, 0,1 e 1 µM de Oua reduziu a viabilidade celular (25±2,5 e 11±6 %, respectivamente). Por sua vez, 48h de incubação com OUA na presença de SFB, reduziu a viabilidade da HUVEC-im somente na concentração de 1 µM (22±4,6 %); já em EA.hy926, esse efeito foi observado nas concentrações  de 0,1 e 1 µM (20±4,2 % e 5,9±1,5 %, respectivamente). De forma interessante observou-se uma redução da viabilidade celular em ambas as linhagens, em 24 e 48h, quando incubadas em meio sem SBF e com Oua 0,1 e 1 µM. Pode-se concluir que a Oua reduz a viabilidade de células endoteliais, dependente da concentração utilizada, do tempo de exposição e da condição estudada. Além disso, culturas endoteliais imortalizadas estudadas possuem diferentes sensibilidades a Oua na presença de SFB. Apoio Financeiro: FAPESP (Processo nº 04201-0), CAPES e CNPq.

   

• Palavras-chave
• ouabaína, endotélio vascular, viabilidade celular.
• Modalidade
• Pôster
• Área Temática
• Trabalhos originais