Avaliação da atividade multifuncional do peptídeo antimicrobiano recombinante Cn-AMP1

  • Autor
  • Valéria Carolinne Muñoz Lara
  • Co-autores
  • Harry Morales Duque , Gabriel Cidade Feitosa , Octávio Luiz Franco
  • Resumo
  • INTRODUÇÃO:O peptídeo Cn-AMP1 isolado da água da Cocus nucifera exibiu atividade antimicrobiana contra bactérias Gram positivas e negativas. Neste trabalho, buscou-se expressar heterologamente o Cn-AMP1 e testá-lo contra Stafilococcus aureus, Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli.

    METODOLOGIA: E. coli foram transformadas utilizando três plasmídeos desenhados contendo a sequência do Cn-AMP1 individual e em sequência in tandem contendo 3 e 5 cópias para serem expressos. O Cn-AMP1 recombinante foi a posteriori purificado por cromatografia de afinidade com metal de níquel imobilizado. Após repurificar os alvos por cromatografia, a concentração inibitória mínima (CIM) foi aferida contra cepas bacterianas por microdiluição seriada. Foram feitas 3 réplicas técnicas e biológicas usando três concentrações (40, 80 e 160 µg.mL-1) dos peptídeos. Dados das bases: BVS, Scielo e PubMed, desde 2005, em inglês e português com palavras-chave: "Cn.AMP1"; "antimicrobial activity"; "cocos nucifera". Foram selecionados 18 artigos.

    RESULTADOS E DISCUSSÃO: A expressão de três construções do Cn-AMP1 (em uma, duas e tres copias in tandem) foi observada utilizando gel de poliacrilamida e espectrometria de massa. A fim de obter a atividade prévia relatada em literatura, a cauda de histidinas desses peptídeos foi clivada. Todavia, quando o Cn-AMP1 recombinante foi testado contra S. aureus, K. pneumoniae e E. coli, o mesmo não foi efetivo no controle do crescimento bacteriano. Os peptídeos Cn-AMP1 in tandem foram avaliados contra E. coli e S. aureus. Porém, não foi observada atividade antimicrobiana nas concentrações testadas.

    CONCLUSÃO: Houve êxito na expressão em E. coli e posterior purificação dos peptídeos do Cn-AMP1 supracitados. Quando bactérias S. aureus, K. pneumoniae e E. coli foram desafiadas aos peptídeos, o crescimento bacteriano não mostrou aparente alteração. No entanto, a busca por moléculas bioinspiradas continua sendo de extrema relevância.

  • Palavras-chave
  • "Cn.AMP1", "antimicrobial activity", "cocos nucifera"
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