INTRODUÇÃO:O peptídeo Cn-AMP1 isolado da água da Cocus nucifera exibiu atividade antimicrobiana contra bactérias Gram positivas e negativas. Neste trabalho, buscou-se expressar heterologamente o Cn-AMP1 e testá-lo contra Stafilococcus aureus, Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli.
METODOLOGIA: E. coli foram transformadas utilizando três plasmídeos desenhados contendo a sequência do Cn-AMP1 individual e em sequência in tandem contendo 3 e 5 cópias para serem expressos. O Cn-AMP1 recombinante foi a posteriori purificado por cromatografia de afinidade com metal de níquel imobilizado. Após repurificar os alvos por cromatografia, a concentração inibitória mínima (CIM) foi aferida contra cepas bacterianas por microdiluição seriada. Foram feitas 3 réplicas técnicas e biológicas usando três concentrações (40, 80 e 160 µg.mL-1) dos peptídeos. Dados das bases: BVS, Scielo e PubMed, desde 2005, em inglês e português com palavras-chave: "Cn.AMP1"; "antimicrobial activity"; "cocos nucifera". Foram selecionados 18 artigos.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: A expressão de três construções do Cn-AMP1 (em uma, duas e tres copias in tandem) foi observada utilizando gel de poliacrilamida e espectrometria de massa. A fim de obter a atividade prévia relatada em literatura, a cauda de histidinas desses peptídeos foi clivada. Todavia, quando o Cn-AMP1 recombinante foi testado contra S. aureus, K. pneumoniae e E. coli, o mesmo não foi efetivo no controle do crescimento bacteriano. Os peptídeos Cn-AMP1 in tandem foram avaliados contra E. coli e S. aureus. Porém, não foi observada atividade antimicrobiana nas concentrações testadas.
CONCLUSÃO: Houve êxito na expressão em E. coli e posterior purificação dos peptídeos do Cn-AMP1 supracitados. Quando bactérias S. aureus, K. pneumoniae e E. coli foram desafiadas aos peptídeos, o crescimento bacteriano não mostrou aparente alteração. No entanto, a busca por moléculas bioinspiradas continua sendo de extrema relevância.
Comissão Organizadora
Congresso Médico UCB
Mariana Martins Castro
Anna Luiza Brito Franceschini
Gabriel Andrade de Santana Xavier
Débora de Freitas Britto Rêgo
Marcos Filipe Bueno Langkamer
Isadora
Caroline Beatriz Santos Oliveira
Clarissa de Lima Oliveira e Silva
Marcela Carvalho
Lucas Anversa Tiarling
Marcella Barreto Campos
Filipe Alves Ramos
Laura Olivia Tavares Souto
Ana Gabriella Tittoto
Weberth Oliveira Santos
Ana Beatriz Stella Marques Mendes
João Vitor Gonçalves Marques
Clarissa de Lima Oliveira e Silva
Comissão Científica