A REDUÇÃO FARMACOLÓGICA DO COLESTEROL DE MEMBRANA ALTERA A SINALIZAÇÃO DA INSULINA EM LINHAGEM CELULAR DE NEUROBLASTOMA

• Autor
• Yandara Akamine Martins
• Co-autores
• Andréa da Silva Torrão
• Resumo

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  Introdução: A desregulação da sinalização da insulina contribui para o envelhecimento e aumenta a susceptibilidade a doenças neurodegenerativas. Alterações na via de sinalização desse hormônio podem ser decorrentes de mudanças de composição lipídica das membranas celulares. A atividade, particionamento e afinidade dos receptores de insulina com a insulina dependem da estrutura e de uma fluidez de membrana adequadas. Objetivo: Avaliar o impacto da redução do colesterol de membrana nas proteínas da via de sinalização da insulina de neurônios da linhagem neuro-2a. Métodos: Células de neuroblastoma de camundongos da linhagem neuro-2a foram expostas a metil-?-ciclodextrina (M?CD) para depleção aguda do colesterol de membrana. A viabilidade celular foi determinada pela técnica da lactato desidrogenase (LDH). As células foram tratadas com 0,25, 0,5 e 1 mM de metil-?-ciclodextrina (M?CD) por 30 minutos. Os níveis das proteínas da via de sinalização da insulina (Akt, GSK3 e ERK) foram analisados por immunoblotting (CEUA n° 8323251119). Resultados preliminares: A M?CD reduziu a viabilidade celular de maneira dose-dependente. Com base no cálculo da concentração efetiva da droga (EC50), as doses de trabalho escolhidas foram 0,25, 0,5 e 1 mM de M?CD, para que a viabilidade celular fosse mantida acima dos 90%. O tratamento com a M?CD por 30 minutos alterou a via de sinalização da insulina (resultados referentes a três ou quatro experimentos independentes). Para a dose de 0,25 mM de M?CD, a razão Akt_ser473/Akt total e GSK3_ser21/9/GSK3 total aumentou em 37 e 18%, respectivamente, em relação ao grupo não tratado. Para as doses de 0,5 e 1 mM, foi observada uma redução da fosforilação da Akt (redução de 25 e 20%, respectivamente) e da GSK3 (redução de 5 e 44%, respectivamente) em relação ao controle. Foi observada uma redução da razão p-ERK/ERK total igual ou superior a 50% para todas as concentrações de M?CD avaliadas. A redução farmacológica do colesterol de membrana com a M?CD alterou a via de sinalização da insulina, no entanto não foi observado diferença significativa entre os grupos, sendo necessários mais experimento para confirmar esses resultados.

• Palavras-chave
• Neurofisiologia, Membrana plasmática, Receptor de insulina
• Modalidade
• Pôster
• Área Temática
• Neurofisiologia

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