Potencial anticolinesterásico da marinobufagina isolada da secreção de Rhinella marina

• Autor
• Rayran Walter Ramos de Sousa
• Co-autores
• Layana Karine Farias Lima , Chistiane Mendes Feitosa , Luciano da Silva Lopes , Anderson Nogueira Mendes , Francisco das Chagas Pereira de Andrade , Gerardo Magela Vieira Junior , Antonia Amanda Cardoso de Almeida , Paulo Michel Pinheiro Ferreira
• Resumo

• Os bufadienolídeos são esteroides cardiotônicos, de origem natural. Uma fonte desses compostos ativos é a secreção de sapos pertencentes à família Bufonidae e o gênero Rhinella apresenta notoriedade. A marinobufagina (MBG) refere-se a um bufadienolídeo isolado, com propriedades cardiotônica, antiproliferativa, antimicrobiana e anti-inflamatória. Nesse âmbito, o presente estudo objetiva caracterizar a atividade enzimática in silico e anticolinesterásica in vitro da MBG. A coleta da secreção do veneno de Rhinella marina foi realizada no estado do Mato Grosso (IBAMA/SISBIO: número 30034-1 / SisGen: AE58A09 / CEUA-UFMT: 23108.700260/14-7). Com o propósito de prever os prováveis alvos macromoleculares do composto, utilizou-se o SwissTatgetPrediction. Para mensurar a porcentagem de inibição da enzima acetilcolinesterase (AChE) promovida pelo composto, a MBG foi preparada e avaliada nas concentrações de 0,3125 a 10 µg/mL. Em placas de 96 poços, nessa sequência, 25 µL do composto foram misturadas a 25 µL da AChE (0,22 U/mL em 50 mMol/L Tris-HCl, tampão pH 8 e 1% de BSA) e com 50 µL de tampão (50 mMol/L Tris-HCl, pH 8 e 1% de BSA) e incubou-se a mistura por 5 min a 37 °C. Em seguida, adicionou-se 125µL de ácido ditiobisnitrobenzóico (DTNB) 3 mMol/L diluído em solução contendo Tris-HCl, pH 8 e 0,1 mol/L de NaCl; 0,02 mol/L MgCl2 e 25µL de iodeto de acetiotiocolina (ATCI) (15 mMol/L em água) para a obtenção subsequente da primeira leitura de absorbância. Uma segunda leitura foi realizada 5 minutos após a primeira. A estimativa in silico dos potenciais alvos farmacológicos da MBG, indica que as proteínas quinases (44 %) possuem destaque, seguido de enzimas em geral (16 %), oxidorredutases (12 %), receptores citoplasmáticos (8 %) e metabotrópicos cada (8 %) e outros (12 %).  A atividade inibitória sobre a enzima AChE foi encontrada em avaliação in vitro, visto que MBG mostrou capacidade de inibição estatisticamente significativa da AChE a partir da concentração de 0,625 µg/mL, quando comparada com o controle negativo (*p < 0,05). Na maior concentração testada (10 µg/mL), MBG inibiu 42,42 % da atividade enzimática enquanto a rivastigmina 50 µg/mL, usada controle positivo inibiu 83,58 % da AChE (*p < 0,05). O estudo in silico sugere que a MBG tenha como alvos relevantes proteínas quinases e enzimas, dentre elas a AChE como confirmando aqui por análises in vitro. Por fim, é válido ressaltar o agradecimento à Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior – Brasil (CAPES) pelo suporte financeiro no desenvolvimento desta pesquisa. 

• Palavras-chave
• Bufadienolídeos; Acetilcolinesterase; In silico
• Modalidade
• Pôster
• Área Temática
• Neurofisiologia

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