Imunolocalização e expressão gênica de receptores hormonais na sínfise púbica de camundongos primíparos e multíparos senescentes na prenhez e no pós-parto

  • Autor
  • Rafaela Ferraz Teixeira
  • Co-autores
  • Paula Andrea Saenz Suarez , Lizandra Maia de Sousa , Fernanda Silva de Oliveira , Sílvio Roberto Consonni
  • Resumo
  • Introdução: A sínfise púbica é uma articulação fibrocartilaginosa que passa por amplas modificações estruturais e moleculares durante a gestação e o puerpério, permitindo a separação dos ossos púbicos e a posterior recuperação tecidual. Esses processos são regulados por hormônios esteroides, como estrógeno e progesterona, e pela relaxina. São reconhecidos os seguintes receptores desses hormônios citados: ER-? (Receptor de Estrogênio Beta), PR (Receptores de Progesterona) e LGR7 (Receptor de Relaxina). Além disso, a paridade pode influenciar diretamente a regulação desses receptores e o remodelamento tecidual da sínfise púbica, sendo assim importante comparar primíparas e multíparas em diferentes momentos gestacionais e pós-parto já que esses dados podem contribuir para a compreensão das disfunções do assoalho pélvico e fornecer suporte para pesquisas que explorem as vias fisiopatológicas e moleculares associadas às alterações no canal do parto

    Objetivos: O presente estudo visa a caracterizar morfologicamente as células e os tecidos presentes na sínfise púbica dos grupos experimentais e a avaliar a expressão espaço-temporal dos receptores ER-?, PR e LGR7 na sínfise púbica de camundongos primíparos e multíparos durante a gestação (dias 12 e 18) e no puerpério (3 e 21 dias pós-parto), combinando análise morfológica, imuno-histoquímica e expressão gênica por qPCR.

    Métodos: Camundongos fêmeas, da linhagem C57BL/6J, foram divididos em grupos primíparos e multíparos. A sínfise púbica foi coletada nos dias 12 e 18 de gestação (D12, D18) e nos dias 3 e 21 pós-parto (3dpp, 21dpp). As amostras foram processadas para análise morfológica em cortes histológicos corados com hematoxilina e eosina (HE), tricrômico de Masson (TM), Sirius Red, imuno-histoquímica com cromógeno DAB (para ER-?, PR e LGR7), e para análise de expressão gênica relativa por qPCR (para ESRRA e LGR7). A análise estatística dos dados de qPCR foi realizada com teste Tukey.

    Resultados: Como resultados preliminares, a avaliação morfológica demonstrou que, ao longo da gestação de fêmeas primíparas, ocorre progressiva separação dos ossos púbicos com formação do ligamento interpúbico (LIp), evidente em D18. Em 3dpp, o LIp começou a regredir, com reorganização cartilaginosa, e aos 21dpp a sínfise apresentava morfologia próxima ao estado pré-gestacional. Em multíparas, a regressão foi mais lenta e incompleta, com maior persistência de tecido conjuntivo propriamente dito e organização alterada. Na imuno-histoquímica, ER-? apresentou expressão nuclear significante de D12 a D18 em ambos os grupos. Após o parto, houve redução da expressão em ambos os grupos, mais significativo nas primíparas em 3dpp. Em 21dpp, primíparas mostraram baixa marcação, enquanto multíparas ainda exibiam focos de positividade ao longo do LIp, sugerindo involução mais lenta. A marcação de PR manteve-se nuclear ao longo dos períodos avaliados. Em primíparas, a intensidade aumentou de forma evidente em 3dpp, sugerindo uma regulação ativa no início do puerpério, e se manteve elevada em 21dpp, com apenas discreta redução. Em multíparas, a expressão foi relativamente constante entre D18 e 3dpp, com leve atenuação posteriormente. Para LGR7, a imunomarcação cito-membranar foi moderada em D12 e atingiu intensidade máxima em D18, especialmente no centro do ligamento de primíparas. Após o parto, a expressão decaiu gradualmente. Em 21dpp, primíparas ainda apresentavam marcação em algumas células, enquanto multíparas mostraram redução mais acentuada. Os dados de qPCR demonstraram que, nas fêmeas primíparas, os níveis de ESRRA foram significativamente menores em D15, D18 e 3dpp em comparação ao D12, com uma discreta elevação em 21dpp, embora ainda abaixo do valor inicial.  Nas multíparas, a expressão de ESRRA foi globalmente mais baixa em todos os tempos quando comparada ao D12 do próprio grupo. Em relação a LGR7, a expressão aumentou progressivamente em primíparas, com máximos em 3dpp e manutenção elevada em 21dpp frente ao D12. Já nas multíparas, a expressão foi relativamente constante durante a gestação, mas apresentou queda significativa após o parto. A comparação entre qPCR e IHC revelou boa correspondência para LGR7: ambas as técnicas indicaram expressão sustentada nas primíparas e queda precoce nas multíparas. Para ESRRA, observou-se relação parcial, com o pico gênico ocorrendo antes da máxima expressão proteica. Estudos adicionais estão em andamento para aprofundar a análise desses marcadores e melhor compreender os mecanismos regulatórios envolvidos.

    Conclusão: A expressão dos receptores ER-?, PR e LGR7 na sínfise púbica de camundongos é dinâmica ao longo da gestação e do puerpério e é modulada pela paridade. Primíparas apresentaram expressão mais intensa e sustentada, associada a remodelamento ativo. Multíparas demonstraram regressão mais lenta e padrão espacial alterado, possivelmente relacionado a exposições gestacionais prévias. A integração entre análises morfológicas, imunohistoquímicas e moleculares reforça o papel crítico dos receptores hormonais na plasticidade tecidual da sínfise púbica.


    PROCESSO FAPESP: 2024/04672-8

  • Palavras-chave
  • Sínfise púbica, multiparidade, disfunções de assoalho pélvico, progesterona, estrogênio, relaxina.
  • Modalidade
  • Comunicação oral
  • Área Temática
  • SAÚDE
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  • MOLECULAR
  • SAÚDE
  • EDUCAÇÃO
  • AMBIENTAL
  • EXTENSÃO

Comissão Organizadora

Estudantes de biologia da Universidade Estadual de Campinas. 

 

 

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